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　　植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA试剂盒使用说明书

　　BS-8050-A 植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA 试剂盒 96T

　　BS-8050-B 植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA 试剂盒 48T

　　一、实验原理

　　本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测植物组织或细胞中的T6P水平。微孔板预包抗T6P抗体，样本中T6P与固相抗体结合后，加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗形成复合物。加入底物TMB显色，TMB在HRP催化下转化为蓝色，酸终止后显黄色，显色深度与样本中T6P浓度呈正相关，于450nm波长测定吸光度计算浓度?。

　　二、试剂盒组成

　　组分 规格 保存条件

　　预包被微孔板 12孔×8条 2-8℃密封干燥

　　标准品 冻干粉 -20℃复溶后分装

　　HRP标记检测抗体 液体 避光2-8℃

　　显色底物(TMB) A液+B液 现用现配，避光

　　终止液 2M硫酸 室温

　　浓缩洗涤液 液体 40℃水浴溶解结晶

　　样本xishi液 液体 含稳定剂

　　注?：不同品牌组分可能存在差异，详见具体说明书。

　　三、样本处理

　　1. 样本类型

　　植物组织?：称取0.1g组织，加入1mL提取液冰浴匀浆，离心取上清。

　　细胞/细菌?：收集离心后弃上清，超声破碎细胞提取上清。

　　2. 保存条件

　　短期?：2-8℃保存≤48小时。

　　长期?：分装后-20℃冻存，避免反复冻融。

　　3. 稀释建议

　　常规样本?：推荐稀释5-20倍(如取20μL样本+180μL稀释液)。

　　高浓度样本?：需预实验确定稀释倍数，最高稀释100000倍(三步稀释法)。

　　四、操作步骤

　　标准品配制?

　　冻干标准品加1mL稀释液复溶，混匀后静置10分钟。

　　进行系列稀释(如8pmol/L→4pmol/L→…→0.5pmol/L)。

　　加样?

　　标准孔：50μL/孔。

　　样本孔：先加40μL稀释液，再加10μL样本(总稀释5倍)。

　　空白孔：不加样本及二抗。

　　孵育?

　　37℃孵育120分钟，洗板3次(每次浸泡1分钟)。

　　显色与终止?

　　每孔加TMB显色液100μL，37℃避光孵育15分钟。

　　加终止液50μL终止反应，30分钟内测OD值。

　　五、注意事项

　　样本避免?：含叠氮钠(NaN3)样本(抑制HRP活性)?。

　　试剂平衡?：使用前室温平衡20分钟，浓缩洗涤液需40℃水浴溶解结晶。

　　质量控制?：建议设置复孔，标准曲线R2应≥0.95。

　　六、结果分析

　　标准曲线?：以OD值对浓度绘制四参数方程。

　　浓度计算?：样本OD值代入曲线方程，再乘以稀释倍数。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA试剂盒 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!本生试剂盒