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大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA检测试剂盒技术说明书
BS-2926大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒
一、产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)，专用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中表皮生长因子(EGF)的含量。试剂盒仅供科研使用，不可用于临床诊断。
二、检测原理
双抗体夹心法：
预包被抗大鼠EGF捕获抗体的微孔板与样本中EGF结合。
加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
经洗涤后，加入TMB显色底物，在HRP酶催化下显蓝色，酸终止后变黄色。
颜色深浅与样本中EGF浓度呈正相关，通过450nm波长测定吸光度(OD值)，计算浓度。
三、试剂盒组成
组分96孔配置48孔配置保存条件
预包被酶标板1块(96孔)1块(48孔)2-8℃
标准品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃f
生物素化检测抗体120μL60μL2-8℃
显色液A/B各6mL各3mL避光，2-8℃
终止液6mL3mL2-8℃
20×浓缩洗涤液60mL30mL室温
封板膜4张2张室温
四、样本处理与保存
血清：
室温凝固10-20分钟，2000-3000转/分离心20分钟，取上清。
避免溶血，2-8℃保存≤48小时，长期需冻存(-20℃或-80℃)，避免反复冻融。
血浆：
使用EDTA/肝素抗凝，离心后取上清，处理方法同血清。
组织匀浆：
生理盐水捣碎，离心取上清。
细胞上清：
离心去除颗粒，取上清液。
五、操作步骤
试剂准备：
洗涤液：用蒸馏水1:20稀释浓缩液。
标准品：按说明书梯度稀释(如80-2.5 U/L)。
加样：
每孔加入50μL标准品/样本，37℃温育30分钟。
洗涤：
每孔加满洗涤液，浸泡30秒后甩干，重复5次。
显色与终止：
加入HRP标记抗体，37℃温育30分钟。
洗涤后，每孔加TMB显色液避光反应15分钟，加终止液终止。
检测：
450nm波长测定OD值，绘制标准曲线计算样本浓度。
六、注意事项
试剂平衡：冷藏试剂需室温平衡15-30分钟后再使用。
加样精度：使用校准的移液器，避免交叉污染。
显色控制：TMB显色后及时终止，避免过度反应。
数据有效性：每次实验需同步做标准曲线，建议设复孔。
七、性能参数
检测范围：31.2-2000 pg/mL(具体以说明书为准)。
灵敏度：≤15.6 pg/mL。
有效期：6个月(2-8℃避光保存)。
八、自备器材
酶标仪(450nm)、恒温箱(37℃)、精密移液器(0.5-1000μL)。
注：本说明书基于ELISA通用技术整理，具体操作请以实际试剂盒说明书为准。 (AI生成)
注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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