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　　大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　BS-2924 大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心法，用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清等样本中的白三烯B4(LTB4)水平。LTB4是花生四烯酸代谢产物，在炎症反应和免疫调节中起关键作用?1。

　　二、检测原理

　　?包被抗体?：微孔板预包抗大鼠LTB4单克隆抗体?1?样本孵育?：样本中的LTB4与包被抗体结合

　　?酶标抗体?：加入生物素化的检测抗体形成复合物?2?显色反应?：加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素，TMB底物显色?1?终止反应?：加入终止液终止反应

　　?检测?：450nm波长测定吸光度(OD值)，浓度与OD值呈正相关?1三、试剂盒组成

　　组分规格保存条件

　　预包被微孔板96孔2-8℃

　　标准品(冻干)6管(1000-0pg/mL)-20℃

　　样本稀释液15mL室温

　　生物素化抗体(100×)120μL-20℃

　　酶标复合物12mL2-8℃

　　TMB显色液(A/B)各6mL2-8℃避光

　　终止液12mL室温

　　20×洗涤液60mL室温

　　四、样本处理

　　?血清/血浆样本?：

　　使用EDTA/肝素抗凝管采集

　　2000-3000转/分离心20分钟

　　避免溶血样本，2-8℃保存≤48小时，长期保存需-20℃?2?细胞培养上清?：

　　离心去除细胞碎片

　　可直接检测或适当稀释

　　五、实验步骤

　　?试剂准备?：

　　洗涤液：用蒸馏水1:20稀释浓缩液?2标准品：用样本稀释液配制梯度浓度(1000-0pg/mL)

　　酶标抗体工作液：按说明书比例稀释

　　?操作流程?：

　　加样(100μL/孔) → 37℃孵育90分钟 → 洗涤4次

　　加酶标抗体(100μL/孔) → 37℃孵育60分钟 → 洗涤4次

　　加TMB显色液(100μL/孔) → 避光显色15-20分钟

　　加终止液(50μL/孔) → 10分钟内测定OD值

　　六、技术参数

　　?检测范围?：62.5-1000pg/mL

　　?灵敏度?：≤1.0pg/mL

　　?精密度?：批内CV<10%，批间CV<15%

　　?回收率?：85%-115%

　　?特异性?：与结构类似物无交叉反应

　　七、注意事项

　　实验前所有试剂需平衡至室温

　　以防试剂间交叉污染，使用一次性枪头

　　显色反应时间需严格控制，避免过度显色

　　酶标仪需提前预热，建议使用双波长(450/630nm)检测

　　本产品仅用于科研，不用于临床诊断

　　八、储存条件

　　未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期6个月

　　开封后组分：按说明书要求分别保存

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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