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小鼠肉碱脂酰转移酶(CPT)ELISA检测试剂盒技术说明书
BS-9438小鼠肉碱脂酰转移酶(CPT)ELISA试剂盒
一、产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,专用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中肉碱脂酰转移酶(CPT-1)的含量。CPT-1是线粒体内膜的关键酰基转移酶,催化脂肪酸转运过程,在能量代谢中起核心作用?。
二、技术参数
检测范围?:0.156-10 ng/mL(以CPT-1A亚型为例)?
灵敏度?:低检测限≤0.1 ng/mL
特异性?:与小鼠CPT-1抗体特异性结合,无交叉反应
重复性?:批内变异系数(CV)<10%,批间CV<15%
有效期?:6个月(2-8℃避光保存)?
三、试剂盒组成
组分 48T规格 96T规格 保存条件
预包被酶标板 8×6条 8×12条 4℃
标准品 1支(冻干) 1支(冻干) -20℃
生物素化检测抗体 60 μL 120 μL -20℃
显色底物(TMB) 3 mL 6 mL 4℃避光
终止液 6 mL 12 mL 室温
20×浓缩洗涤液 30 mL 60 mL 室温
四、样本处理规范
血清/血浆采集?:
使用无热原、无内毒素试管,避免溶血。
3000×g离心10分钟(血清)或30分钟(血浆),取上清。
短期保存(2-8℃≤48小时),长期需分装-20℃/-80℃冻存,避免反复冻融?。
组织匀浆制备?:
称取0.1g组织或500万细胞,加入1mL裂解液。
冰浴匀浆后,600×g离心5分钟弃沉淀,上清液11000×g离心10分钟取上清?。
五、操作流程
标准品稀释?:
取7支EP管,标注1/2至1/64梯度,每管加入200μL标准品稀释液。
首管加入200μL原液混匀,依次等比稀释至1/64浓度?。
酶标板操作?:
每孔加入100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟。
洗涤3次后,加入100μL生物素化抗体,37℃孵育60分钟。
加入100μL辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素,37℃孵育30分钟。
显色反应:每孔加入90μL TMB底物,避光孵育15分钟,终止液终止反应。
读数分析?:
酶标仪450nm波长测定OD值,绘制标准曲线计算样本浓度。
六、注意事项
质量控制?:每批次实验需设置空白孔、标准曲线孔及复孔。
干扰因素?:避免使用高脂/溶血样本,洗涤需以减少背景噪声。
安全防护?:终止液含liusuan,操作时佩戴防护装备。
七、应用领域
基础研究?:解析小鼠脂肪酸代谢机制。
药物开发?:评估代谢类药物的疗效。
疾病模型?:研究肥胖、糖尿病等代谢性疾病?。
本试剂盒仅供科研使用,不可用于临床诊断。详细操作请参阅随附说明书。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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