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大鼠白介素27(IL-27)ELISA检测试剂盒技术说明书
BS-2900大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒
一、产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附技术，专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清中的白介素27(IL-27)。IL-27是由EBI3和p28亚基组成的异源二聚体，在免疫调节中发挥重要作用?。
二、检测原理
固相包被?：抗大鼠IL-27单抗预包被于微孔板。
复合物形成?：样本中IL-27与包被抗体结合，加入生物素标记的检测抗体形成夹心结构。
酶联反应?：加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素结合。
显色测定?：加入TMB底物显色，终止液终止反应后，在450nm波长下测定OD值，浓度与OD值呈正相关?。
三、试剂盒组分
组分 规格 储存条件
预包被微孔板 96孔/48孔 2-8℃
标准品(冻干粉) 6个浓度梯度 -20℃
生物素标记抗体 100×浓缩液 -20℃
HRP标记链霉亲和素 100×浓缩液 -20℃
TMB显色液 避光保存 2-8℃
终止液(2M硫酸) 室温 避光
浓缩洗涤液(20×) 需稀释 室温
样本稀释液 即用型 2-8℃
四、样本要求
样本类型?：
血清/血浆：EDTA抗凝，离心后取上清。
组织匀浆：生理盐水匀浆，离心取上清。
细胞上清：离心去除细胞碎片。
保存条件?：
短期(≤7天)：2-8℃。
长期(>7天)：-20℃或-70℃，避免反复冻融?。
五、实验步骤
1. 标准品配制
用样本稀释液复溶冻干标准品，稀释至6个浓度梯度(如1000、500、250、125、62.5、0 pg/mL)。
2. 加样与孵育
每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤5次，每次300μL洗涤液，拍干。
3. 抗体反应
加入100μL生物素标记抗体，37℃孵育60分钟。
洗涤后加入100μL HRP标记物，37℃孵育30分钟。
4. 显色与终止
加入90μL TMB底物，避光孵育15-20分钟。
加入50μL终止液终止反应?。
5. 检测
酶标仪450nm波长测定OD值。
六、结果计算
以标准品浓度为横坐标(X)，OD值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。
样本浓度根据OD值从标准曲线中读取，若超出范围需稀释后复测?。
七、技术参数
参数 指标
检测范围 15.6-1000 pg/mL
灵敏度 ≤5.7 pg/mL
精密度(批内/批间) CV <10%/CV <12%
回收率 血清91%、EDTA血浆93%、肝素血浆94%
八、注意事项
试剂保存?：
未开封试剂盒：-20℃保存1年。
开封后：4℃保存1周，长期需分装-20℃。
操作规范?：
避免溶血、脂血样本。
洗涤需净，拍干后立即下一步。
终止液为酸性，需防护皮肤和眼睛?。
质量控制?：
每批实验设空白孔和标准曲线，R2需>0.95。
样本稀释后需重新检测。
九、常见问题
OD值过高?：样本浓度过高，需稀释。
显色不均?：检查洗涤或加样准确性。
线性差?：重新配制标准品或更换试剂?。
十、适用范围
本试剂盒仅供科研使用，不可用于临床诊断?。
注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!
