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小鼠左旋肉碱(L-Carnitine)ELISA试剂盒技术说明书
BS-9435 小鼠左旋肉碱(L-Carnitine)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
预包被板条:96孔微孔板,包抗小鼠L-Carnitine单克隆抗体
标准品:冻干粉(含已知浓度L-Carnitine,需复溶)
酶标二抗:HRP标记抗L-Carnitine多克隆抗体
显色底物:TMB溶液(避光保存)
终止液:2M lusuan溶液
洗涤液:20×浓缩PBS缓冲液(需稀释)
样本稀释液:专用缓冲液(减少基质干扰)
二、样本要求
血清/血浆:采集后离心(3000g,10min),避免溶血
组织匀浆:按1:9比例加入PBS,冰浴匀浆后离心取上清
保存条件:-20℃短期存放,避免反复冻融
三、检测流程
步骤操作条件
1. 加样每孔加入50μL标准品/样本(复溶后稀释5倍)室温避光
2. 温育封板膜密封,37℃孵育60分钟水平震荡
3. 洗涤洗涤液注满各孔,静置30秒后拍干(重复5次)洗板机推荐
4. 加酶每孔加入100μL酶标二抗37℃孵育30分钟
5. 显色加入TMB底物50μL,避光反应15分钟37℃
6. 终止加入50μL终止液,立即测定15分钟内完成
四、结果计算
酶标仪:450nm读取OD值
标准曲线:四参数逻辑回归(R2≥0.99)
样本浓度:OD值对应浓度×稀释倍数
五、性能参数
检测范围:0.02-40 ng/mL(线性范围)
灵敏度:低检出限<0.02 ng/mL
特异性:与小鼠L-Carnitine交叉反应率>95%,无心肌cTnI交叉反应
精密度:批内CV≤10%,批间CV≤15%
六、注意事项
试剂保存:未开封试剂2-8℃保存,开封后按有效期使用
操作规范:
移液器吸头不可混用,避免交叉污染
显色反应需严格避光,避免气泡干扰
质控要求:
每板设置空白孔及双复孔
样本稀释比例需预实验优化
废弃物处理:含生物样本的耗材需高压灭菌后丢弃
七、适用仪器
酶标仪(450nm波长)
洗板机(推荐使用)
备注:本说明书基于同类ELISA试剂盒通用规范编写,具体参数以实际产品附带资料为准。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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