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小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)ELISA试剂盒技术说明书
BS-2682小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)ELISA试剂盒
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术,通过预包被小鼠UGT1A1单抗的微孔板捕获样本中的目标抗原,再与HRP标记的二抗形成复合物。经TMB底物显色后,450nm波长下测定吸光度(OD值),其与UGT1A1浓度呈正相关^^1^^。
试剂盒组成
核心组件:
预包被微孔板(96孔,12条×8孔)
UGT1A1标准品(78-5000pg/ml梯度浓度)
HRP标记检测抗体、显色剂(TMB)、终止液
浓缩洗涤液(需30倍稀释)
辅助材料:样本稀释液、封板膜、密封袋等。
操作步骤
样本处理:
血清/血浆:3000rpm离心10分钟,避免溶血;若需保存,-20℃分装防反复冻融。
标准品稀释:
原倍标准品(5000pg/ml)按2倍梯度稀释至5个浓度点。
加样与孵育:
每孔加标准品/样本50μl,37℃孵育30分钟;
洗涤5次后加入HRP抗体,重复孵育。
显色与测定:
加入TMB避光显色15分钟,终止液终止反应后读取OD值。
注意事项
样本要求:避免NaN3(抑制HRP活性),溶血样本需重新采集。
操作规范:
加样时避免触碰孔壁,显色前摇匀试剂;
超范围样本需用稀释液调整后复测。
保存条件:试剂盒2-8℃避光保存,使用前室温平衡20分钟。
数据计算
通过标准曲线拟合样本OD值,乘以稀释倍数(若有)得实际浓度。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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