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微生物过氧化物酶(POX)ELISA试剂盒技术说明书
BS-5182 微生物过氧化物酶(POX)ELISA试剂盒
一、实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术,通过以下步骤实现POX定量检测:
固相包被:微孔板预包被抗POX捕获抗体,形成固相载体。
抗原结合:待测样本中的POX与捕获抗体特异性结合,形成抗体-抗原复合物。
酶标显色:加入HRP标记的检测抗体,通过TMB底物显色反应,颜色深浅与POX浓度呈正相关。
二、试剂盒组成
组分规格保存条件
预包被微孔板96孔/板2-8℃(避光)
POX标准品6浓度梯度-20℃
HRP标记检测抗体1瓶4℃(避光)
TMB显色底物1瓶4℃(避光)
终止液(2M H?SO?)1瓶室温
三、操作步骤
样本处理
微生物培养液:离心(10,000g,10min)取上清,避免反复冻融。
组织匀浆:按1:5比例加入PBS(pH 7.4)匀浆,离心后取上清。
检测流程
加样:每孔加入100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟.
洗涤:弃液后拍干,重复洗涤3次(每次300μL PBS-Tween) .
显色:加入TMB底物100μL,避光反应15分钟,终止后测450nm吸光度.
四、注意事项
试剂保存:TMB底物需避光保存,避免冻融.
交叉污染:移液枪头需一次性使用,不同样本间更换枪头.
数据有效性:标准曲线R2需≥0.98,样本OD值需在标准曲线范围内.
五、技术参数
灵敏度:≤0.5 pg/mL(超灵敏型) .
检测范围:0.5-2000 pg/mL(线性范围).
批内/批间变异系数:<10%。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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