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微生物过氧化物酶(POX)ELISA试剂盒技术说明书
发布时间:2025/10/14浏览:33次
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  微生物过氧化物酶(POX)ELISA试剂盒技术说明书

  BS-5182 微生物过氧化物酶(POX)ELISA试剂盒

  一、实验原理

  本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术,通过以下步骤实现POX定量检测:

  固相包被:微孔板预包被抗POX捕获抗体,形成固相载体。

  抗原结合:待测样本中的POX与捕获抗体特异性结合,形成抗体-抗原复合物。

  酶标显色:加入HRP标记的检测抗体,通过TMB底物显色反应,颜色深浅与POX浓度呈正相关。

  二、试剂盒组成

  组分规格保存条件

  预包被微孔板96孔/板2-8℃(避光)

  POX标准品6浓度梯度-20℃

  HRP标记检测抗体1瓶4℃(避光)

  TMB显色底物1瓶4℃(避光)

  终止液(2M H?SO?)1瓶室温

  三、操作步骤

  样本处理

  微生物培养液:离心(10,000g,10min)取上清,避免反复冻融。

  组织匀浆:按1:5比例加入PBS(pH 7.4)匀浆,离心后取上清。

  检测流程

  加样:每孔加入100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟.

  洗涤:弃液后拍干,重复洗涤3次(每次300μL PBS-Tween) .

  显色:加入TMB底物100μL,避光反应15分钟,终止后测450nm吸光度.

  四、注意事项

  试剂保存:TMB底物需避光保存,避免冻融.

  交叉污染:移液枪头需一次性使用,不同样本间更换枪头.

  数据有效性:标准曲线R2需≥0.98,样本OD值需在标准曲线范围内.

  五、技术参数

  灵敏度:≤0.5 pg/mL(超灵敏型) .

  检测范围:0.5-2000 pg/mL(线性范围).

  批内/批间变异系数:<10%。

  注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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