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大鼠血管紧张素1型受体(AT1)ELISA试剂盒实验原理
大鼠AT1受体ELISA试剂盒基于?双抗体夹心法?(Sandwich ELISA)原理,通过特异性抗体捕获目标蛋白并定量检测其浓度?。
1. ?核心步骤?
包被抗体固定?:微孔板预包被抗大鼠AT1受体的单克隆抗体,形成固相捕获层?。
抗原-抗体结合?:样本(如大鼠血清、组织匀浆)中的AT1受体与包被抗体结合,形成“抗体-抗原"复合物?。
酶标二抗反应?:加入生物素标记的二抗(如抗AT1受体多抗),与抗原结合后形成“抗体-抗原-酶标抗体"复合物?。
显色检测?:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素(SABC)和底物(TMB),酶催化反应
生成蓝色产物,终止后变黄色,450nm测吸光度(OD值)?。
2. ?定量分析?
标准曲线法:通过已知浓度的AT1受体标准品建立OD值与浓度的线性关系,样本浓度通过曲线拟合计算?。
灵敏度与范围:典型检测范围为3.12-200 ng/mL,适用于大鼠样本中AT1受体的高灵敏度检测?。
3. ?技术特点?
特异性?:抗体对AT1受体具有高亲和力,避免与其他血管紧张素受体(如AT2)交叉反应?。
信号放大?:生物素-亲和素系统增强信号,提高检测灵敏度?。
4. ?应用场景?
心血管研究?:分析AT1受体在高血压、心肌肥厚等疾病模型中的表达变化?。
药物筛选?:评估AT1受体拮抗剂的药效?。
5. ?注意事项?
样本处理?:避免反复冻融,血清/血浆需离心去除颗粒物?。
干扰因素?:高脂或溶血样本可能影响结果,需预处理?。
注:以上仅供参考,科研使用,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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