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以下是关于小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理:
BS-2220 小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体夹心法ELISA技术。将抗Aβ1-42抗体预包被于微孔板,加入样本和标准品后,与HRP标记的检测抗体形成复合物,经TMB显色后通过酶标仪测定OD值,颜色深浅与Aβ1-42浓度呈正相关?12。
二、试剂盒组成
?主要组分?:
预包被微孔板(96T/48T)
标准品(浓度通常为160-400pg/mL)?24HRP标记检测抗体?3TMB显色液及终止液?15浓缩洗涤液(需稀释使用)?38?保存条件?:
未开封试剂盒:2-8℃保存,有效期6个月?14开封后:建议分装冻存于-20℃(避免反复冻融)?46三、样本处理
?血清/血浆?:
采集后需离心(1000×g,10-30分钟),分离上清?14避免溶血或脂血样本?45?组织匀浆/细胞上清?:
离心去除沉淀后取上清检测?46四、操作步骤
?标准品稀释?:按说明书梯度稀释(通常为2-90pg/mL范围)?25?加样与孵育?:
每孔加入样本或标准品100μL,37℃孵育1-2小时?13?洗涤?:使用稀释后的洗涤液洗板3-5次?38?显色与终止?:
加入TMB显色10-15分钟,终止液终止反应?15?检测?:
450nm波长读取OD值,绘制标准曲线计算浓度?25五、注意事项
?质量控制?:
板内/板间变异系数应<10%?5回收率建议在84-101%范围内?5?操作规范?:
避免使用金属头移液器接触底物?3不同批号试剂不可混用?36六、结果判读
典型标准曲线范围:15.62-1000pg/mL,检测限通常<31.25pg/mL?57。建议每次实验独立建立标准曲线?5。
如需具体品牌试剂盒的完整说明书,可提供供应商名称进一步查询。