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0.1mL 96孔PCR板使用指南
更新时间:2025-09-19浏览:217次

  0.1mL 96孔PCR板使用指南

  1. ?耗材选择与适配性?

  材质与规格?:选择聚丙烯(PP)材质、0.1mL容积的96孔板,确保与荧光定量PCR仪(如ABI 7500fast、Roche 480等)的加热模块匹配?。

  颜色与裙边?:

  透明板适用于底部光源仪器,乳白色板(如伯乐CFX系列)适合顶部荧光采集?。

  根据仪器需求选择无裙边、半裙边或全裙边设计,避免因边缘凸起导致加热不均?。

  2. ?实验前准备?

  环境控制?:在超净台或生物安全柜中操作,紫外线消毒30分钟以上,使用无核酸酶枪头/离心管?。

  样本布局?:优先使用中间60孔(弃用边缘孔),纵向排列样本以减少热盖压力不均影响?。

  3. ?加样与密封?

  加样技巧?:

  每孔反应体系10-20μL,采用反向移液法(高粘度样本)或正向移液法(常规样本),误差控制在±1%内?。

  加样后瞬时离心(1000rpm×10s)消除气泡?。

  密封方法?:使用光学膜密封,先纵向压膜,再横向按压边缘,确保无漏液?。

  4. ?上机与扩增?

  仪器设置?:确认温度、循环数、荧光采集参数与试剂盒说明书一致,注意是否需ROX参比染料?。

  耗材检查?:避免使用普通PCR耗材(透光性差)或错误规格的板(如0.2mL板用于0.1mL???,防止热传导不均或假阴性?。

  5. ?常见问题与解决?

  扩增异常?:若曲线异常,检查耗材质量(如封膜变形导致光学扭曲)、试剂有效期及冻融次数?。

  蒸发控制?:密封不严会导致ROX荧光上抬,需确保封膜紧密?。

  6. ?注意事项?

  一次性使用?:PCR板不可重复使用或剪开,避免交叉污染和实验误差?。

  存储条件?:未开封试剂盒建议2-8℃保存,部分组分需-20℃避光?。

  注:以上仅供参考,科研使用,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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