联系电话：
18502669006
服务热线： 15502280048
服务热线： 
本生分享Elisa试剂盒实验的技巧及注意事项
以下是ELISA试剂盒实验的关键技巧与注意事项总结，本生结合操作规范与常见问题解决方案：
一、实验前准备?
试剂平衡?
所有试剂需提前30分钟室温平衡(20-25℃)，避免温度差异导致反应不均?。
标准品溶解后需静置10-30分钟，避免涡旋震荡导致蛋白变性?。
移液器校准?
移液枪误差需<2%，每年至少校准一次，日?？捎么克圆?。
加样时选择量程的35%-100%范围(如20μL用20-200μL枪)?。
二、加样操作技巧?
加样规范?
枪头悬空45°贴壁加样，避免触碰孔底或产生气泡?。
每孔加样量误差需<5%，复孔加样时间差≤5分钟?。
顺序控制?
加样顺序需一致(如标准品→样本→抗体)，显色时间需同步?。
漏加样本需记录，不可补加(避免交叉污染)?。
三、孵育与洗涤?
孵育条件?
37℃避光孵育(误差±0.5℃)，震荡孵育可提高反应效率?。
封板膜需一次性使用，避免多次开闭导致污染?。
洗涤要点?
手工洗板需垂直拍干，机器洗板需检查冲洗头是否堵塞?。
洗涤次数≥3次(含0.05% Tween-20)，每次30秒?。
四、显色与终止?
显色控制?
TMB底物需全程避光，显色时间20分钟(最长不超过30分钟)?。
显色过强时需提前终止(最高标准品显色达平台期)?。
终止反应?
终止液加入后5分钟内读数，避免信号衰减?。
五、常见问题处理?
问题? ?解决方案?
高背景值 增加封闭时间(1-2小时)或洗涤次数?
标准曲线R2<0.98 检查标准品稀释是否充分混匀?
显色不均 检查底物是否避光保存或酶标抗体失效?
注：不同品牌试剂盒参数可能差异较大，建议以实际说明书为准。
注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。
ELISA试剂盒 移液器 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!本生试剂盒
