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ELISA实验常见问题的综合解答
更新时间:2025-09-01浏览:167次

  ELISA实验?常见问题的综合解答

  以下是关于本生?ELISA实验?常见问题的综合解答,结合多个高可信度来源整理:

  一、样本处理与适用性?

  非标准样本类型?:

  若样本类型未在试剂盒说明书中标注,建议先进行预实验验证适配性,或直接联系厂家获取技术文献支持?。

  溶血影响?:

  轻微溶血可通过?增加洗板次数?(如5次以上)降低背景值;严重溶血需重新取样?。

  冻融影响?:

  反复冻融会导致蛋白降解,建议分装保存(如每管100μL),避免多次冻融?。

  二、样本类型选择?

  样本类型? ?适用场景? ?注意事项?

  血清? 免疫检测、生化分析 缺乏凝血因子,避免纤维蛋白干扰?

  血浆? 凝血因子检测、蛋白定量 需添加抗凝剂(如EDTA、肝素)?

  三、实验操作关键点?

  包被与封闭?:

  抗体/抗原需用包被缓冲液(pH 9.0–9.6)稀释,37℃孵育2小时或4℃过夜?。

  封闭步骤不可省略?,推荐使用牛血清白蛋白(BSA)或脱脂奶粉?。

  洗涤与显色?:

  洗涤需(3–5次),避免残留物干扰?。

  显色阶段需避光,TMB底物反应时间控制在10–30分钟?。

  常见问题排查?:

  假阳性?:可能由试剂污染或洗板不充分引起?。

  白板/显色淡?:检查抗体活性、孵育时间或底物失效?。

  四、标准曲线与结果计算?

  标准品需覆盖预期样本浓度范围,相关系数(R2)应≥0.99?。

  终止液加入后15分钟内完成读数,避免信号衰减?。

  如需进一步了解具体操作细节,可观看以下视频教程:

  以上内容综合了样本处理、实验操作及异常结果解析,确保实验准确性。


试剂盒常见问题及解决方案.png


  注:以上资料仅供参考,不作为实验依据,具体产品资料请咨询技术老师或品牌供应商。

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